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溶血标本对哪些结果有影响?

 答:溶血干扰的机理有三种:
(1)血细胞内高浓度物质逸出,使血清(浆)分析物浓度增加。不难理解如果血细胞中某一分析物浓度大大高于血清,则溶血无疑会导致血清中该成分浓度的增高。
(2)Hb对分光光度法测定中吸光度的干扰。溶血能引起可见光谱的短波长段(300-500nm)的吸光度明显增加,而影响测定结果。
(3)某些细胞成分对化学反应的干扰。如血清CK动力学法测定中因RBC来源的腺苷酸激酶(AK)参与其指示反应而使CK结果假性增高,血红蛋白可与双缩脲试剂反应, 其反应复合物可使540nm 的吸光度增加,从而使结果偏高。溶血可使血清中LDH、CK、ALT等酶随溶血加重而升高;使ALP、r-GT的活性随溶血加重而降低,但机理尚不清楚。 溶血对酶以外的生化指标,除K+、BIL最受干扰外,对TP、ALb、Ca2+、Na+、Cl-、Fe2+、Pi3+、TC、TG、HDL-c、Cr、BUN、GLU、UA等无明显影响。

生化双试剂为什么出现R1、R2试剂量不匹配?

 答:双试剂项目一段时间做下来后,试剂盒中就会出现R1比R2多出很多情况,原因是加试剂时试剂针都有剩余量,而且随加的量不同,剩余量也不同;以日立仪器为例,在日立生化仪(如7170)操作手册上有个关于"试剂针都有剩余量,而且随加的量不同,剩余量也不同"的表格如下(数据大概是这样):

 

     试剂针吸试剂总量   31ul 64 ul 117 ul 171ul 224ul 277ul
     应加试剂量 (吐出) 20ul 50 ul 100 ul 150ul 200ul 250ul
     试剂针剩余量(浪费) 11ul 14 ul 17 ul  21ul  24ul   27ul

举个例子,做ALT,反应试剂参数,R2为50ul,R1为200ul,   R2:R1=1:4
日立生化机实际做时R2要吸掉64ul,     R1吸掉224ul,     R2:R1=1:3.5
这个吸样比例与实际需要的比例(试剂盒标称的比例)失衡!时间一久,就会造成R2用完而R1还剩余很多的情况。

试剂间化学污染有哪些原因?

 答:试剂间化学污染的原因很多,常见的类型主要有以下几种:

1.   试剂成分的直接污染:上一测定试剂中含有下一测定所需要测定的物质,直接干扰下一检测的测定结果。如:AMY试剂中含有较高浓度的Ca2+ ;ALP(IFCC法)、CK(NAC法)、CK-MB(NAC法)、CO2(PEPC法)、AMY(EPS法)、TG等试剂中含有Mg2+;GLU(氧化酶法)、TP、ACP试剂中含有较高浓度的K+;CHE、CHOL、GLU(GOD法)、UA(尿酸酶法)、LDH(IFCC法)、HBDH(DGKC法)等试剂中含有磷酸缓冲液;CHOL、TG、HDL-C试剂中含有胆酸钠;AST(IFCC法)、ALT(IFCC法)、试剂中含哟高活性LDH;以上试剂的交叉污染就会分别对Ca2+、Mg2+、K+(紫外酶法)、P、TBA、LDH的测定结果造成干扰。

2.   试剂成分参与反映:上一个试剂中含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用,因而干扰下一反应的测定结果。如:(1)镁测定试剂的络合剂亦能与铁结合,影响铁有铁络合剂的结合;(2)直接胆红素(重氮法)试剂含EDTA,镁试剂中含有EGTA,均能与Ca结合,从而影响Ca的测定;(3)以甘油作为酶保护剂的试剂,会对TG的测定带来干扰;(4)钙(MTB法)试剂对钾有负干扰;(5)CHOL试剂中含有胆固醇酯酶,可水解胆固醇酯形成游离胆固醇,而引起对游离胆固醇测定的干扰。

3.   反应进程相同:上一试剂所引导的反应对下一个项目的反应进程带来间接的干扰,下一项目所测定的是前后两个项目反应的综合作用结果 。如:(1)当上一个反应产物为H2O2时则对以Trinders反应产生颜色的测定结果引起干扰。如UA对CHOL结果的影响;CHOL对CREA(酶法)测定结果的影响;GLU(氧化酶法)对CREA测定结果的影响。(2)CK(NAC法)、CK-MB(NAC法)试剂中含GLU成分,其分析方法的原理中GLU的已糖激酶(HK)反应过程,因此可能对GLU的测定带来干扰。

 4.   影响反应条件:影响下一项目的反应条件如pH等,从而改变反应速率。如:(1)直接胆红素(钒酸盐氧化法)试剂中含有表面活性剂的酒石酸盐缓冲液会影响ALT活性,对测定结果有负干扰。(2)CREA(苦味酸速率法)反应条件为碱性,果糖胺(动力学法)反应条件为酸性,受到污染后反应速率会减慢。(3)CREA(酶法)史试剂中含有抗坏血酸氧化酶,影响了氧化还原反应的进程,会对 TBA(酶循环法)测定结果有影响。